Дочь испанского короля Филиппа III, пыталась проводить происпанскую политику. Поддерживала заговоры против Ришельё.

Брак Людовика и Анны 23 года был бездетным, и только в 1638 и 1640, после нескольких неудачных беременностей у Анны, родились их два сына, будущие Людовик XIV и Филипп I Орлеанский.

В 1643—1651 регент при малолетнем Людовике XIV, фактически государством управлял Дж. Мазарини, назначенный ею первым министром. В 1661, после смерти Мазарини, когда Людовик XIV стал править самостоятельно, Анна удалилась в монастырь Валь-де-Грас.

Скончалась 20 января 1666, от рака груди.